ForeDirect RT-qPCR Kit
Lýsing
ForeDirect RT-qPCR Kit er hannað fyrir beina RNA-mögnun í rauntíma úr þurrkusöfnum án RNA-hreinsunarferla.Þetta sett lýkur qRT-PCR lotunum innan einnar klukkustundar.Ensímblandan er fínstillt blanda af bakriti, Hot-Start Taq DNA pólýmerasa, RNase hemli.Viðbragðsbuffinn inniheldur alla nauðsynlega íhluti, þar á meðal fínstillta biðminni, Mg2+, dUTP og dNTP.
Tæknilýsing
100T
Kit íhlutir
Kjarnsýrulosunarefni |
RNA verndandi |
2× RT-qPCR biðminni |
Ensímblanda (Taq&M-MLV) |
Leiðbeiningar |
PCR umsókn
1. Þegar PCR hvarfglösin hafa verið skilin stutt í skilvindu skaltu setja þau í sýnatankinn á mögnunartækinu.
2. Thermal siðareglur
Skref | Hitastig | Tími | Hringrásir | |
1 | Öfug umritun | 50 ℃ | 15 mín | 1 |
2 | Pre-denaturation | 95 ℃ | 1 mín | 1 |
3 | Denaturation | 95 ℃ | 10 sekúndur | 42 |
4 | Gleypa/framlenging | 60 ℃ | 30 sekúndur |
Athugið:Flúrljómandi merki greindist strax eftir framlengingarþrep hverrar lotu.
3. Eftir stillingu skaltu vista skrána og keyra viðbragðsforritið.
Rekstrarskref
Áður en hvarfefni er undirbúið skal þíða öll hvarfefnin í settinu við stofuhita og blanda varlega saman.
Undirbúningur hvarfefnis
1. Undirbúið kjarnsýrulosunarblönduna
Hluti | Hljóðstyrkur á sýni eða stýringu |
Kjarnsýrulosunarefni | 5μL |
RNA verndandi | 0,5 μL |
2. Undirbúið hvarfblönduna
Hluti | Hljóðstyrkur á sýni eða stýringu |
2× RT-qPCR biðminni | 15 μL |
Ensímblanda (Taq&M-MLV) | 1,5 μL |
Grunnur og rannsaka | 1μL |
Geymsla og geymsluþol
- Settið á að geyma á -20± 5℃.Gildistími er 12 mánuðir.
-Forðastu endurteknar frystingar-þíðingarlotur (<5 lotur).