Animal Total RNA Einangrunarsett Heildar RNA útdráttur og hreinsunarsett fyrir vefi og frumur dýra
Kit Lýsing:
Dragðu út háhreint og hágæða heildar-RNA á fljótlegan og skilvirkan hátt úr ýmsum dýravefjum.
Engin þörf á að hafa áhyggjur af niðurbroti RNA.Allt kerfið er RNase-frjáls
Fjarlægðu DNA á áhrifaríkan hátt með því að nota DNA-hreinsunarsúluna
Fjarlægðu DNA án þess að bæta við DNase
Einfalt - öllum aðgerðum er lokið við stofuhita
Hratt—aðgerð er hægt að ljúka á 30 mínútum
Öruggt - ekkert lífrænt hvarfefni notað
Hár hreinleiki—OD260/280≈1.8-2.1
Lýsingar á pökkum
50 undirbúningur, 200 undirbúningur
Þetta sett notarsnúningsdálk og formúluþróað af fyrirtækinu okkar, sem getur dregið út háhreint og hágæða heildar-RNA úr ýmsum dýravef með mikilli skilvirkni. Það veitir skilvirka DNA-hreinsunarsúlu, sem getur auðveldlega aðskilið og aðsogað erfðafræðilegt DNA frá flotinu og vefjalýsinu, einfalt og tímasparandi;RNA-einungis súla getur á skilvirkan hátt bundið RNA og hægt er að vinna hana samtímis með einstakri formúlu Fullt af sýnum.
Allt kerfið er RNase-Free, þannig að útdregið RNA er ekki brotið niður;Buffer RW1, Buffer RW2 buffer þvottakerfi, þannig að RNA sem fæst er laust við mengun próteina, DNA, jóna og lífrænna efnasambanda.
Kit íhlutir
| Animal Total RNA einangrunarsett | ||
| Kit íhlutir | RE-03011 | RE-03014 |
| 50 T | 200 T | |
| Buffer RL1* | 25ml | 100ml |
| Buffer RL2 | 15ml | 60ml |
| Buffer RW1* | 25ml | 100ml |
| Buffer RW2 | 24ml | 96ml |
| RNase-frítt ddH2O | 10ml | 40ml |
| Dálkur eingöngu fyrir RNA | 50 | 200 |
| DNA-hreinsunarsúla | 50 | 200 |
| Leiðbeiningar bæklingur | 1 stykki | 1 stykki |
Upplýsingar um vöru
| Snið | Snúa dálk | Hreinsunarþáttur | Foregene súla, hvarfefni |
| Flux | 1-24 sýni | Tími á undirbúningi | ~30 mín (24 sýni) |
| Miðflótta | Skilvindu skrifborðs | Pyrolysis aðskilnaður | Miðflóttaaðskilnaður |
| Sýnishorn | Dýravefur;klefi | Magn sýna | Vefur: 10-20 mg;Hólf:(1-5)×106 |
| Rúmmál skolunar | 50-200 μL | Hámarkshleðslumagn | 850 μL |
Eiginleikar og kostir
■ Engin þörf á að hafa áhyggjur af niðurbroti RNA;allt kerfið er RNase-frjáls
■ Fjarlægðu á áhrifaríkan hátt DNA með því að nota DNA-hreinsunarsúlu
■ Fjarlægðu DNA án þess að bæta við DNase
■ Einföld-allar aðgerðir eru gerðar við stofuhita
■ Hægt er að ljúka hröðum aðgerðum á 30 mínútum
■ Öruggt - ekki þarf lífrænt hvarfefni
■ Hár hreinleiki -OD260/280≈1,8-2,1
Kit umsókn
Það er hentugur fyrir útdrátt og hreinsun á heildar-RNA úr ýmsum ferskum eða frosnum dýravef eða ræktuðum frumum.
Vörubreytur
■ Niðurstraumsnotkun: fyrsta strengs cDNA nýmyndun, RT-PCR, sameindaklónun, Northern Blot o.fl.
■ Sýni: dýravefur, ræktaðar frumur
■ Skammtar: Vefur 10-20mg, frumur(2-5)×106
■ Hámarks DNA bindingargeta hreinsunarsúlunnar: 80 μg
■ Rúmmál skolunar: 50-200 μl
Skýringarmynd
Animal Total RNA einangrunarsett meðhöndlað 20mg
Fersk músasýni, taktu 5% hreinsað heildar-RNA 1% agar
Glycogel rafskaut
1: Milta 2: Nýra
3: Lifur 4: Hjarta
Geymsla og geymsluþol
Settið má geyma í 24 mánuði við stofuhita (15–25 ℃) eða 2–8 ℃ í lengri tíma.Buffer RL1 má geyma við 4 ℃ í 1 mánuð eftir að β-merkaptóetanól er bætt við (valfrjálst).
Tilvitnaðar greinar
1.IF:18.808:Zheng, Q., Qin, F., Luo, R., o.fl.mRNA-hlaðnar lípíð-eins nanóagnir fyrir lifrarbasa klippingu með hagræðingu á miðlægri samsettri hönnun.Adv.Virka.Mater.2021, 31, 2011068.doi:10.1002/adfm.202011068.
2.IF:18.187:He X, Hong W, Yang J, o.fl.Sjálfkrafa frumudauða frumna í meðferðarstofnfrumugerð hefur ónæmisbælandi áhrif með losun fosfatidýlseríns.Signal Transduct Target Ther.2021 14. júlí;6(1):270.doi: 10.1038/s41392-021-00688-z.
3.EF:17.97:Dai Z, Liu H, Liao J, o.fl.N7-metýlgúanósín tRNA breyting eykur krabbameinsvaldandi mRNA þýðingu og stuðlar að framgangi kólangíókrabbameins í lifur.Mol Cell.29. júlí 2021:S1097-2765(21)00555-4.doi: 10.1016/j.molcel.2021.07.003.
4.EF:9.225:Cao X, Shu Y, Chen Y, o.fl.Mettl14-miðluð m6A breyting auðveldar endurnýjun lifrar með því að viðhalda endoplasmic reticulum homeostasis.Cell Mol Gastroenterol Hepatol.2021;12(2):633-651.doi: 10.1016/j.jcmgh.2021.04.001.
RNA einangrunarsett fyrir aðrar sýnishornsheimildireru í boði:
Fruma, planta, veira, blóð osfrv.
RNA er ekki dregið út eða afrakstur RNA er lág
Það eru oft ýmsir þættir sem hafa áhrif á skilvirkni bata, svo sem: RNA innihald vefsýnissýnis, vinnsluaðferð, skolrúmmál o.s.frv.
1. Ísbað eða kryógenísk (4 °C) skilvindu var framkvæmd meðan á aðgerðinni stóð.
Ráðlegging: Vinnið við stofuhita (15-25°C) í öllu ferlinu, ekki ísbað og skilið við lágt hitastig.
2. Óviðeigandi varðveisla sýna eða of langur geymslutími sýna.
Ráðlegging: Geymið sýni við -80 °C eða frystið í fljótandi köfnunarefni og forðastu endurtekna frystingar-þíðingu;reyndu að nota ferskan vef eða ræktaðar frumur til RNA útdráttar.
3. Ófullnægjandi sýnisgreining.
Ráðlegging: Þegar vefur er einsleitur skal tryggja að vefurinn sé nægilega einsleitur og að veffrumurnar séu nægilega klofnar til að skýra losun RNA.
4. Losunarefninu er ekki bætt á réttan hátt.
Tilmæli: Staðfestu að RNase-Free ddH2O er bætt í dropatali við miðja hreinsunarsúluhimnu.
5. Rétt magn af algeru etanóli var ekki bætt við Buffer RL2 eða Buffer RW2.
Ráðlegging: Fylgdu leiðbeiningunum, bættu réttu magni af algeru etanóli við Buffer RL2 og Buffer RW2 og blandaðu vel saman áður en settið er notað.
6. Skammtur vefjasýnis er ekki viðeigandi.
Ráðlegging: Notaðu 10-20 mg af vefjum eða (1-5) × 106frumur á 500 μl biðminni RL1, þar sem óhófleg vefjanotkun getur leitt til minni útdráttar RNA.
7. Óviðeigandi skolunarrúmmál eða ófullkomin skolun.
Ráðlegging: Skolunarrúmmál hreinsunarsúlunnar er 50-200 μl;ef skolunaráhrifin eru ekki fullnægjandi er mælt með því að lengja uppsetningartímann við stofuhita eftir að forhituðu RNase-Free ddH hefur verið bætt við.2O, td í 5-10 mín.
8.Hreinsunarsúlan hefur etanólleifar eftir Buffer RW2 þvott.
Ráðlegging: Ef það eru etanólleifar eftir þvott með Buffer RW2, skilvindu í tómum túpum í 1 mín., má auka tímann fyrir skiljun í tómu túpunni í 2 mín, eða setja hreinsunarsúluna við stofuhita í 5 mínútur til að fjarlægja etanólleifar nægilega vel.
Hreinsað RNA er brotið niður
Gæði hreinsaðs RNA eru tengd þáttum eins og varðveislu sýnisins, RNase mengun og meðhöndlun osfrv.
1. Vefjasýni eru ekki geymd í tíma.
Ráðlegging: Ef vefjasýni eða frumur eru ekki notuð tímanlega eftir söfnun, skal tafarlaust frysta við -80 °C eða fljótandi köfnunarefni.Til að draga út RNA, notaðu nýtekið vef- eða frumusýni þegar mögulegt er.
2. Endurtekin frostþíðing vefjasýna.
Ráðleggingar: Þegar vefjasýni eru geymd er best að skera þau í litla bita til varðveislu og fjarlægja einn bita þegar þeir eru notaðir til að forðast endurtekna frostþíðingu á sýninu og niðurbrot RNA.
3. RNase er innleitt eða ekki með einnota hanska, grímur o.s.frv. meðan á aðgerðinni stendur.
Ráðlegging: RNA útdráttartilraunir eru best gerðar í aðskildum RNA meðferðarherbergjum og borðið er hreinsað fyrir tilraunina.
Notaðu einnota hanska og grímur meðan á tilrauninni stendur til að lágmarka niðurbrot RNA af völdum innleiðingar RNase.
4. Hvarfefni eru menguð af RNase við notkun.
Ráðlegging: Skiptu út fyrir nýtt Animal Total RNA einangrunarsett fyrir tengdar tilraunir.
5. Skilvindurörin, oddarnir o.s.frv., sem notuð eru við RNA-meðferð, eru menguð af RNase.
Ráðlegging: Staðfestu að skilvindurörin, oddarnir, pípetturnar o.s.frv. sem notaðar eru við RNA-útdrátt séu öll RNase-laus.
Hreinsað fengin RNA hefur áhrif á tilraunir niðurstreymis
RNA hreinsað með hreinsunarsúlunni, ef saltjónirnar, próteininnihaldið er of stórt mun hafa áhrif á tilraunina á eftir, svo sem: öfug umritun, Northern Blot et al.
1. Hið skolaða RNA hefur saltjónaleifar.
Ráðlegging: Staðfestu að réttu magni af etanóli hafi verið bætt við Buffer RW2 og framkvæmið 2 hreinsunarsúluþvotta við miðflóttahraðann sem tilgreindur er fyrir notkun;ef einhverjar saltjónaleifar eru til staðar, látið hreinsunarsúluna standa í Buffer RW2 í 5 mínútur við stofuhita og framkvæma skilvindu til að hámarka fjarlægingu saltmengunar.
2. Etanólleifar í skoluðu RNA.
Ráðlegging: Staðfestu að eftir þvott á biðminni RW2, framkvæmið skiljunaraðgerðina á tómum túpunni við skilvinduhraðann sem tilgreindur er fyrir notkun, aukið tímann fyrir skiljunaraðgerðina í tómu túpunni í 2 mínútur ef enn er etanólleifar, eða látið það vera við stofuhita í 5 mínútur eftir skilvindu í tómu hólknum til að hámarka fjarlægingu á etanólleifum.
