Direct RT-qPCR Kit II
Kit Lýsing:
◮Direct RT-qPCR Kit, sem notar Foreasy Reverse Transcriptase og Foreasy HS Taq DNA Polymerase sem þróast af Foregene, með einstökum hvarfstuðpúða, gerir þetta sett með sterka mótstöðu og eindrægni, og það getur beint prófað hvarf með Foregene Lysis kerfi sem sniðmát.Þetta sett getur sótt um COVID-19 kjarnsýrugreiningarsett og aðrar sjúkdómsvaldandi bakteríur kjarnsýrugreiningarsett.
Lýsing
Direct RT-qPCR Kit býður upp á sérpakkaðan RT-qPCR jafna, afar skilvirkan Foreasy HS Taq DNA fjölliðunog Foreasy Reverse Transcriptase (MMLV),sem gerir það þægilegt að búa til bakendasett og kerfisaðlögun, með einfaldri sannprófun.
Direct RT-qPCR Kit, sem notar Foreasy Reverse Transcriptase og Foreasy HS Taq DNA Polymerase sem þróast af Foregene, með einstökum hvarfstuðpúða, gerir þetta sett með sterka mótstöðu og eindrægni, og það getur beint prófað hvarf með Foregene Lysis kerfi sem sniðmát.Þetta sett getur sótt um COVID-19 kjarnsýrugreiningarsett og aðrar sjúkdómsvaldandi bakteríur kjarnsýrugreiningarsett.
Þetta sett getur beint verið hluti af IVD vörunni, notað auðveldlega og hratt.Það þarf aðeins auðvelda staðfestingu, án þess að þróast aftur.
Tæknilýsing
500T, 50.000T
Kit íhlutir
| Innihald setts (20 μL hvarfkerfi) | IM-05111-02 | IM-05112-02 |
| 500 T | 50.000 T | |
| Foreasy Reverse Transcriptase (200 U/μL) | 50 μL×1 | 1 ml×5 |
| Foreasy HS Taq DNA pólýmerasi (5 U/μL) | 100 μL×1 | 1 ml×10 |
| 2× Bein RT-qPCRBuffer | 1 ml × 5 | 500 ml × 1 |
| Kennsla | 1 | 1 |
Rekstrarskref
A: Undirbúðu sniðmát og hvarfefni
1. Undirbúið tilbúið RNA sniðmát (Mælt er með því að nota Foregene Total RNA Isolation Kit röð sett til að draga út og hreinsa RNA sniðmát) eða sýnissprunguafurð (mælt er með að nota Foregene Lysis kerfi), sérstaka grunna (10 μM) og aðrar viðeigandi rekstrarvörur, tæki.
2. Settu 2× Direct RT-qPCR Buffer, RNase-Free ddH2O og 20× ROX Reference Dye (ef þess er þörf) í kassann með ís, láttu þetta bráðna náttúrulega og blandaðu varlega saman.
B: Undirbúa RT-qPCR kerfi
Fáðu helming af rúmmáli hvarflausnarefna hvarfkerfisins (til dæmis ef rúmmál kerfisins er 20 μL þarf það að fá 10 μL 2× Direct RT-qPCR buffer). Fyrirsamsvarandi magn af ensími, við mælum með þvíM-MLV：10-30 U/20 μL hvarfkerfi,TaqDNA pólýmerasi：1-2 U/20 μL hvarfkerfiþetta er tillaga okkar, þú ættir að prófa og laga hana), bætið við RNA sniðmáti, sérstökum frumurum og rannsaka, og bætið við RNase-frjáls ddH2O til 20 μL.Hægt er að vísa til sértækrar undirbúnings RT-qPCR hvarfkerfis í eftirfarandi töflu 1.
Tafla 1: Undirbúningur RT-qPCR kerfis
| Hluti | Bindi | Endanleg einbeiting |
| 2× Beinn RT-qPCR biðminni | 10 μL | 1× |
| Foreasy Reverse Transcriptase (MMLV) | 10-30 U | |
| Foreasy HS Taq DNA pólýmerasi | 1-2 U | |
| Áfram grunnur (10 μM) | 0,8 μL | 50-900nM |
| Reverse Primer (10 μM) | 0,8 μL | 50-900nM |
| Kanni (4 μM) | 1 μL | 200nM |
| Sniðmát (RNA eða lýsat) | X μL | |
| 20× ROX viðmiðunarlitur | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6,4-X) μL | |
| Heildarmagn | 20 μL |
Athugið: Forward Primer og Reverse Primer eru sérstakir primers markgena.Kerfi qPCR gæti verið stillt í samræmi við hagnýt tilrauna- og PCR módel.Við mælum með 400nM fyrir lokastyrk flestra grunna.Stilltu rúmmál tiltekinna grunna og rannsaka í samræmi við tilbúinn styrk og ráðlagðan lokastyrk, vinsamlegast.
1*: Veldu viðeigandi lokastyrk af ROX Reference Dye í samræmi við mismunandi magn PCR tæki.Ákjósanlegur ROX viðmiðunarlitarstyrkur algengra megindlegra PCR tækja er sýndur í eftirfarandi töflu:
| Magn PCR tæki | Lokastyrkur ROX Reference Dye |
| ABI PRISM 7000/7300/7700/7900HT/Skref eitt,o.s.frv. | 1× (td bæta við 1μl 20×ROX viðmiðunarlitarefni í 20 μL hvarfkerfi) |
| ABI 7500, 7500 Fast, Stratagene Mx3000P, Mx3005P og Mx4000 o.fl. | 0,5× (td bæta við 0,5μl 20×ROX viðmiðunarlit í 20 μL hvarfkerfi) |
| Roche PCR tæki, Bio-Rad PCR tæki, Eppendorf magn PCR tæki o.fl. | Án ROX Reference Dye |
Geymsla og geymsluþol
Settið ætti að geyma við -20 ± 5 ℃.Það ætti strax að geyma í -20 ℃ hitastillum ísskáp.Gildistími er 2 ár ef það er geymt í hæfilegu ástandi.
