Lnc-RT Heroᵀᴹ I(Með gDNase)(Super Premix fyrir fyrsta strengs cDNA nýmyndun úr lncRNA)
Tæknilýsing
25×20μl Rxns, 50×20μl Rxns
Lnc-RT HeroTM I (Með gDNase) er öfugt umritunarkerfi sem er sérstaklega þróað fyrir lncRNA til að fjarlægja erfðafræðilega DNA mengun fljótt.5×gDNase Mix getur fljótt fjarlægt erfðamengið sem eftir er í RNA við 42°C í 2 mínútur og forðast í raun truflun erfðamengisins á qPCR niðurstöður.
5×L-RT HeroTM Mix inniheldur Foregene LncRNA bakrita sem er sérstaklega þróað af Foregene, sem er ný tegund bakrita sem er sérstaklega fyrir lncRNA og önnur löng RNA flókin sniðmát, með sterkari RNA sækni og meiri skilvirkni við bakfærslu.Bjartsýni kerfið gerir öfuga umritunarhraða hraðari og getur auðveldlega umritað RNA sniðmát með hátt GC innihald og flókna aukabyggingu.Hægt er að klára fyrsta streng cDNA nýmyndun við 42°C á 15 mínútum.
Kit íhlutir
5× gDNase blanda |
5× L-RT HeroTM blanda |
RNase-frítt ddH2O |
Leiðbeiningar |
Eiginleikar og kostir
■Skilvirk hæfni til að fjarlægja gDNA, sem getur fjarlægt gDNA í sniðmátinu innan 2 mínútna.
■ Það getur á skilvirkan hátt snúið við umritun lncRNA.Þegar öfugumritunarafurðin er háð qPCR er Ct gildið lægra en hefðbundið öfugt umritunarkerfi.
■ Skilvirkt öfugt umritunarkerfi, það tekur aðeins 15 mínútur að klára myndun fyrsta strengs cDNA.
■ Flókin sniðmát: Einnig er hægt að snúa við sniðmátum með háu GC innihaldi og flókinni aukabyggingu með mikilli skilvirkni.
■ Hánæmt öfugt umritunarkerfi, pg-stigi sniðmát geta einnig fengið hágæða cDNA.
■ Öfugritunarkerfið hefur mikinn hitastöðugleika, ákjósanlegur hvarfhiti er 42℃, og það hefur enn góða afköst um öfuga umritun við 50℃.
Kit umsókn
LncRNA hlutfallsleg magngreining.
lncRNA alger magngreining.
Það getur fljótt og nákvæmlega greint snefil-RNA eins og RNA-vírus.
Öfug umritun á RNA sniðmátum með hátt GC innihald eða flókna aukabyggingu.
Vinnuflæði
Geymsla og geymsluþol
Settið ætti að geyma við -20°C. Geymið vöruna í stöðugum hita í kæli við -20°C strax eftir móttöku.Ef geymsluaðstæður eru viðeigandi mun varan ekki skerða neina frammistöðu á 1 árs gildistímanum.
Leiðbeiningar um vandamálagreiningu
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the use of Lnc-RT HeroTM I (With gDNase) series kits, hoping to be helpful to your experiments. In addition, we have dedicated technical support to help you with other experimental or technical problems beyond the operating instructions and questions. If you have any needs, please contact us: 028-83361257 or E-mail: Tech@foregene.com.
Non-sérstaka mögnun
1. Ósanngjörn grunnhönnun
Ráðlegging: Hannaðu grunnar samkvæmt grunnhönnunarreglum.
2. Erfðamengi leifar.
Tillaga: Gakktu úr skugga um að fyrsta skref viðbragðshitastigs við fjarlægingu gDNA sé 42°C og einnig er hægt að lengja viðbragðstímann í 5 mín.
Ekkert mögnunarmerki með RT-qPCR
1. RNA er brotið niður.
Ráðleggingar: Efnið til RNA-útdráttar ætti að vera eins ferskt og mögulegt er og nota ætti hágæða og hreint RNA.
2. RNA inniheldur hemla.
Ráðlegging: Bakumritunarhemlar innihalda almennt SDS, gúanidínsölt, EDTA osfrv. Mælt er með því að þvo RNA botnfallið með 70% etanóli til að fjarlægja hemlana.
3. Grunnhönnunarmál.
Tilmæli: Samkvæmt grunnhönnunarreglunni skaltu endurhanna grunninn til skoðunar.
Marksviðið birtist í auða stjórninni
1. Mengun rekstrarverkfæra eða hvarfefna.
Tilmæli: Öll hvarfefni eða búnaður fyrir tilraunina ætti að vera í autoclave.Vertu varkár og varkár við meðhöndlun til að koma í veg fyrir að DNA sýni sogist inn í pípettuna eða hellist út úr skilvindurörinu.
2. Mengun átti sér stað við undirbúning PCR hvarfkerfisins.
Ráðlegging: Gerðu nauðsynlegar varúðarráðstafanir við meðhöndlun, svo sem: að vera í latexhönskum, nota síuspár.Notaðu Real Time PCR Mix í mengunarheldu kerfi.
3. Grunnarnir eru niðurbrotnir.
Tillaga: Notaðu SDS-PAGE rafdrætti til að greina hvort primerarnir eru niðurbrotnir og skiptu út fyrir nýja primera fyrir flúrljómunargreiningartilraunir.
Leiðbeiningar bæklingur: