Ertu enn að nota Trizol til að vinna út RNA?
Djöfull, leyfðu mér ekki að hafa áhyggjur af heilsu þinni!
Trizol er að verða jaðarsett, ekki segja mér að þú sért enn í myrkrinu?

Aðalhluti Trizol hvarfefnisins er fenól og lífrænum hvarfefnum eins og klóróformi er einnig bætt við í tilraunaaðgerðinni.Langtíma útsetning mun skaða heilsu þína, sérstaklega bein snerting við húð getur valdið alvarlegum efnabruna og varanlegum örum.

Undir venjulegum kringumstæðum geta samstarfsaðilar rannsóknarstofunnar aðeins dregið úr hættunni með því að vopna sig að fullu (klæðast rannsóknarfrakka, hönskum og grímum).

Og ráð mitt til þín er: vinsamlega skiptu Trizol beint út til að forðast skaða frá upptökum.

1. Fyrsta kynslóð vara RNA útdráttar
Kom út árið 1987 (Trizol hvarfefni)

kostur:
Fullkomnari útdráttur

Ókostir:
Eitrað hvarfefni eins og guanidín ísóþíósýanat-fenól-klóróform eru nauðsynleg;
Fyrirferðarmikill rekstur;
Þarftu að nota DNase til að fjarlægja DNA mengun

2. Önnur kynslóð vara RNA útdráttar
Kom út árið 1994 (QIAGEN RNeasy og flestar innlendar vörur)

kostur:
Miðflóttaaðferð súlu er notuð, sem er auðvelt í notkun;

Ókostur:
Þarftu að skilvinda til að fjarlægja vefjarusl
Þarftu að nota DNase til að fjarlægja DNA mengun

3.Þriðja kynslóðar afurð RNA útdráttar
Kemur út árið 2005 (QIAGEN RNeasy Plus og ForegeneRNA hreinsunarvörur)

kostur:
Notaðu DNA flutningssúluna beint til að fjarlægja DNA og vefjarusl á sama tíma og sparar tíma og fyrirhöfn;
Öruggt og þægilegt, engin þörf á að bæta við síusúlu og DNase til að fjarlægja óhreinindi auðveldlega og forðast DNA mengun

Við skulum skoða rekstrarmuninn á milli fyrstu kynslóðar vörunnar (Trizol), annarrar kynslóðar vörunnar (RNeasy) og þriðju kynslóðar vörunnar (Foregene) við RNA útdrátt:

Aðgerðin á myndinni er skýr: þriðja kynslóð vara hefur augljósa kosti

Aðeins þrjú orð til að lýsa: auðvelt!Hratt!Öryggi

PK grafið yfir tilraunaniðurstöðurnarfyrirfyrstu kynslóðar, annarrar kynslóðar og þriðju kynslóðar afurðir RNA útdráttar:

1. Erafhljóðrit

Fyrsta kynslóðin (1: Trizol)
Önnur kynslóð (2:QIAGEN RNeasy)
Þriðja kynslóðin (3: QIAGEN RNeasy plus, 4: Foregene)

Hvers konar vara er góð, þú munt vita með samanburði
RNA dregið út með Foregene settinu
Ekki aðeins mikil einbeiting heldur einnig góð heilindi

2.qPCR línurit (magnunarferill graf)

Fyrsta kynslóðin (Trizol)

Önnur kynslóð (himinblárþýðirQIAGEN RNeasy-, rauðurþýðirQIAGEN RNeasy +)

Þriðja kynslóðin (blár þýðir Foregene, grænn þýðir QIAGEN RNeasy plus)

(Athugið: Önnur kynslóð QIAGEN RNeasy af qPCR línuritinu þýðir að settið bætir ekki við DNase og fjarlægir ekki DNA mengun. Þess vegna er CT hærri og niðurstaðan er ekki nákvæm; QIAGEN RNeasy + þýðir að DNase hefur verið bætt við og DNA mengunin hefur verið fjarlægð og niðurstaðan er nákvæm)

Hvort sem um er að ræða rafskaut eða magnbundið PCR mögnunarferilgraf, eru gæði Foregene afurða ekki síðri en erlendar innfluttar vörur.