Hot-start Taq ensím er mikið notað.Í samanburði við venjulegan DNA-pólýmerasa getur hot-start Taq ensím á áhrifaríkan hátt forðast ósértæka mögnun og myndun primer dimera og getur í raun bætt árangur af mögnun markgena.Sérstaklega á sviði erfðarannsókna hefur heitbyrja Taq ensím verið skilgreint sem skyldubundinn staðall í iðnaðinum og ætti ekki að nota venjulegan DNA pólýmerasa.Eins og sjá má af ofangreindu eru heitbyrjuð Taq ensím mikið notuð.Sem stendur eru mörg vörumerki af heitbyrja Taq ensímum á heimamarkaði, en það eru ekki mörg heitbyrjuð Taq ensím með hágæða.Frammi fyrir svo mörgum heitum Taq ensímvörum, hvernig ættum við að velja?

1. Veldu heitræsta Taq ensímið með mikilli mögnunarvirkni

Skilvirkni PCR mögnunar er nátengd virkni Taq ensíms.Eftir að gott Taq ensím hvarfkerfi hefur verið fínstillt er mögnunarvirknin yfir 95% og mögnunarsvið upphafssniðmátsins er breitt.Viðunandi mögnun er hægt að fá þegar markgenainnihaldið er lágt og það er ekki auðvelt að eitra fyrir þegar sniðmátmagnið er hátt og veldisvísismögnunartímabilið er langt.Fyrir Taq ensímið með lélega afköst, jafnvel þó að hvarfkerfið hafi verið fínstillt í mörg skipti, er mögnunarvirknin enn minni en 90%, "S" lögun mögnunarferilsins er ekki augljós, hallinn er lítill og ferillinn er flatur.Þegar magn sniðmáts er lítið er ekki hægt að magna það og þegar magn sniðmáts er hátt eru mögnunaráhrifin ekki tilvalin.Þess vegna er val á DNA pólýmerasum með mikilli mögnunarvirkni afgerandi fyrir árangur PCR og qPCR.

2. Veldu heitræsta Taq ensím með sterkan ensímkraft

Ensímkraftur Taq ensímsins er tengdur mögnunarvirkninni.Almennt, því sterkari sem ensímkraftur Taq ensímsins með heitbyrjun er, því lengra er veldisvaxtartímabil PCR mögnunar, því dæmigerðari 'S-laga' ferill, því hærra er flúrljómunarmerkjagildi og því hentugra fyrir multiplex PCR greiningu.Vörumerki DNA pólýmerasar með veikt ensímafl geta yfirleitt aðeins stutt við 2-plex viðbrögð.Þegar 3-plex viðbrögð eru gerð er mögnunarferillinn lágur, flúrljómunarmerkisgildið er lágt og engin dæmigerð mögnunarferill, þannig að erfitt er að dæma niðurstöðurnar.

3. Veldu heitræst Taq ensím með mikið næmni

Almennt séð hefur DNA pólýmerasi mikla mögnunarvirkni og mikið næmi, en það er líka ósamræmi.Ef markgenagnægð sýnisins sem á að magna er lágt er mælt með því að prófa mögnunarnæmi Taq ensímsins.Algengasta greiningaraðferðin er að framkvæma 10-falda eða 5-falda hallaþynningu á markgeninu plasmíðbroti, framkvæma PCR uppgötvun við lægri þynningu og velja heitbyrjun Taq ensímið með hærra greiningarnæmi.

Af ofangreindu má sjá að rannsakendur þurfa að velja eftir eigin tilraunakröfum og fjármögnunarskilyrðum.Best er að gera mögnunartilraun með hallaþynningu til að greina mögnunarvirkni og næmni Taq ensímsins með heitbyrjun.

Dæmi um Foregene's Taq DNA pólýmerasi:

Foreasy HS Taq DNA pólýmerasi

Lýsing

Foreasy HS Taq DNA pólýmerasi er DNA pólýmerasi sem tjáður er í Escherichia coli verkfræðilegum bakteríum með genasamsetningartækni.Ensímið er sameinað einstakt hvarfbuffffer, sem gerir vöruna mjög ónæma og samhæfa, og getur beint notað sýnislýsatið (Foregene Lysis system) sem sniðmát fyrir greiningarviðbrögð.

Umsókn

Eigindleg PCR og megindleg PCR uppgötvun á hreinsuðum sniðmátum og óhreinsuðum sniðmátum.

Gæðaeftirlit

1. Engin utanaðkomandi núkleasavirkni greind

2.PCR aðferð til að greina leifar af erfðamengi DNA án hýsils

3. Það getur á áhrifaríkan hátt magnað upp einstaks gen í erfðamengi mannsins

4. Geymið við stofuhita í viku, engar augljósar breytingar á virkni

Upplýsingar um vöru: https://www.foreivd.com/foreasy-hs-taq-dna-polymerase-product/