Plant DNA einangrunarsett Genomic Plant DNA Purification Kits Protocol
Tæknilýsing
50 undirbúningur, 100 undirbúningur, 250 undirbúningur
Þetta sett notar súlu eingöngu fyrir DNA sem getur sérstaklega bundið DNA, Foregene próteasa og einstakt jafnakerfi, sem einfaldar hreinsun erfðaefnis DNA plantna til muna.Hægt er að fá hágæða erfðafræðilegt DNA innan 30 mínútna, sem kemur í veg fyrir niðurbrot erfðafræðilegs DNA.
Kísilgelhimnan sem eingöngu er fyrir DNA sem notuð er í snúningssúlunni er einstakt nýtt efni Foregene, sem getur tengst DNA á áhrifaríkan og sértækan hátt og hámarkað fjarlægingu RNA, óhreinindapróteina, jóna, fjölsykrum, fjölfenóla og annarra lífrænna efnasambanda.
Vöruíhlutir
Buffer PL1, Buffer PL2 |
Buffer PW, Buffer WB, Buffer EB |
Foregene próteasi |
Dálkur eingöngu fyrir DNA |
Leiðbeiningar |
Eiginleikar og kostir
■ Engin RNase mengun: DNA-einungis súlan sem settið býður upp á gerir það mögulegt að fjarlægja RNA úr erfðaefnis DNA án viðbótar RNase meðan á tilrauninni stendur og kemur í veg fyrir að rannsóknarstofan mengist af utanaðkomandi RNase.
■ Hraður hraði: Foregene Protease hefur meiri virkni en svipaðir próteasar og meltir vefjasýni hraðar.
■ Einfalt: Hægt er að klára erfðafræðilega DNA útdráttaraðgerðina á 30 mínútum.
■ Þægilegt: Skiljunin er framkvæmd við stofuhita, ekki er þörf á 4 ℃ lághitaskilvindu eða etanólútfellingu DNA.
■ Öryggi: ekki er þörf á lífrænu hvarfefni.
■ Hágæða: Hreinsað erfðafræðilegt DNA hefur stór brot, ekkert RNA, engin RNase og afar lágt jónainnihald, getur uppfyllt kröfur ýmissa tilrauna.
Kit umsókn
Hentar til útdráttar og hreinsunar á erfðafræðilegu DNA úr ferskum eða frosnum plöntuvef.
Vinnuflæði
Skýringarmynd
Geymsla og geymsluþol
Settið má geyma í 12 mánuði við stofuhita (15–25 ℃) og 2–8 ℃ í lengri tíma.
Foregene Protease Plus lausnin hefur einstaka formúlu, sem er virk þegar hún er geymd við stofuhita í langan tíma (3 mánuði);virkni þess og stöðugleiki verður betri þegar hún er geymd kl4 ℃, svo það er mælt með því að geyma það við 4 ℃, mundu að geyma ekki við -20 ℃.
Leiðbeiningar um vandamálagreiningu
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the extraction of plant genomic DNA, hoping to be helpful to your experiments. In addition, for other experimental or technical problems other than operation instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us: 028-83360257 or E-mali: Tech@foregene.com.
Lítil uppskera eða ekkert DNA
Það eru yfirleitt margir þættir sem hafa áhrif á afrakstur erfðafræðilegs DNA, þar á meðal uppruna sýnisins, aldur sýnisins, geymsluaðstæður sýnisins og aðgerð.
Ekki var hægt að fá erfðafræðilegt DNA við útdrátt
1. Vefsýnin eru óviðeigandi geymd eða geymd of lengi, sem leiðir til niðurbrots erfðaefnis DNA.
Ráðlegging: Geymið vefjasýni í fljótandi köfnunarefni eða -20°C;reyndu að nota nýsöfnuð sýni fyrir erfðafræðilega DNA útdrátt.
2. Of lítið magn sýnis getur valdið því að samsvarandi erfðafræðilegt DNA verði ekki dregið út.
Tillaga: Fyrir vefjasýni sem hafa verið geymd í langan tíma eða hafa alvarlegt erfðafræðilegt DNA niðurbrot má auka magn vefjasýna á viðeigandi hátt til að draga út talsvert erfðafræðilegt DNA.Magn sýnisins er hægt að ákvarða í samræmi við DNA-þarfir, en ferska sýnið ætti ekki að fara yfir 100mg og þurra sýnið ætti ekki að fara yfir 30mg.
3. Sýnið er ekki malað með fljótandi köfnunarefni eða sett of lengi á eftir fljótandi köfnunarefni.
Tillaga: Við DNA-útdrátt þarf að mala sýnið að fullu með fljótandi köfnunarefni til að brjóta frumuvegginn;eftir mölun, vinsamlegast flytjið sýnisduftið yfir í PL1 sem er forhitað við 65°C eins fljótt og auðið er (þegar malað duftið er bráðnað mun erfðafræðilegt DNA byrja að brotna hratt niður).
4. Óviðeigandi geymsla Foregene próteasa leiðir til minnkaðrar eða óvirkrar virkni.
Ráðlegging: Staðfestu geymsluskilyrði Foregene Protease eða skiptu því út fyrir nýjan Foregene Protease fyrir ensím vatnsrof.
5. Settið er óviðeigandi geymt eða geymt of lengi, sem veldur því að sumir íhlutir í settinu bila.
Tilmæli: Keyptu nýtt erfðafræðilegt DNA útdráttarsett fyrir plöntur fyrir skyldar aðgerðir.
6. Óviðeigandi notkun á settinu.
Tillaga: Keyptu plöntu DNA einangrunarsett sem er tileinkað sýnum til útdráttar og hreinsunar á erfðaefni plöntu DNA.
7. Buffer WB án þess að bæta við avatnslaus etanól.
Ráðlegging: Gakktu úr skugga um að bæta réttu magni af algeru etanóli við Buffer WB.
8. Skoðun var ekki dreypt á kísilhimnuna rétt.
Tillaga: Bætið forhitaðri skolvatninu við 65℃dropatali að miðju kísilgelhimnunnar og látið hana standa við stofuhita í 5 mínútur til að auka skilvirkni skolunar.
Útdráttur til að fá láguppskeru erfðafræðilegt DNA
1. Sýnið er óviðeigandi geymt eða geymt of lengi, sem leiðir til niðurbrots erfðafræðilegs DNA.
Ráðlegging: Geymið vefjasýni við -20℃;reyndu að nota nýsöfnuð vefjasýni fyrir erfðafræðilega DNA útdrátt.
2. Ef magn vefjasýna er of lítið verður útdregna erfðaefnis-DNA minna.
Tillaga: Sum plöntusýni eru rík af vatni, svo sem vatnaplöntur eins og þörungar o.s.frv., má auka skammtinn á viðeigandi hátt eða þurrka vatnið aðeins fyrir aðgerð.
3. Sýnin voru ekki vandlega möluð með fljótandi köfnunarefni eða voru látin standa við stofuhita of lengi eftir mölun.
Tillaga: Fljótandi köfnunarefnismölun verður að vera nægjanleg og sýnisfrumuveggurinn ætti að vera brotinn eins mikið og mögulegt er;strax eftir slípun skal flytja sýnisduftið í 65℃forhitaður Buffer PL1 fyrir næsta skref.
4. Ekki nota rétta settið.
Ráðleggingar: Notaðu sérstakt DNA einangrunarsett fyrir plöntur til að draga út og hreinsa erfðaefni plantna.
5. Óviðeigandi geymsla Foregene próteasa leiðir til minnkaðrar eða óvirkrar virkni.
Ráðlegging: Staðfestu geymsluskilyrði Foregene Protease eða skiptu því út fyrir nýjan Foregene Protease fyrir ensím vatnsrof.
6. Losunarvandamál
Ráðlegging: Vinsamlegast notaðu Buffer EB fyrir skolun;ef þú notar ddH2O eða önnur skolefni, vertu viss um að pH-gildi skolefnisins sé á milli 7,0-8,5.
7. Ekki er rétt lekið á skolvatninu
Tillaga: Vinsamlegast bætið skolunardropanum við miðja kísilhimnuna og látið hann standa við stofuhita í 5 mínútur til að auka skilvirkni skolunar.
8. Rúmmál skolvatnsins er of lítið
Tillaga: Vinsamlega notaðu skolefnið fyrir erfðafræðilega DNA skolun samkvæmt leiðbeiningunum, að minnsta kosti ekki minna en 100μl.
Dregið erfðafræðilegt DNA með litlum hreinleika
Lítill hreinleiki erfðafræðilegs DNA mun leiða til misheppnaðra eða lélegra áhrifa tilrauna á eftir, svo sem: ekki er hægt að klippa ensímið og ekki er hægt að fá markgenbrotið með PCR.
1. Ýmis próteinmengun, RNA mengun.
Greining: Buffer PW var ekki notaður til að þvo súluna;Buffer PW var ekki notaður til að þvo súluna á réttum skilvinduhraða.
Tillaga: reyndu að tryggja að engin úrkoma sé í flotinu þegar flotið fer í gegnum súluna;vertu viss um að þvo hreinsunarsúluna með Buffer PW samkvæmt leiðbeiningunum og ekki er hægt að sleppa þessu skrefi.
2. Óhreinindi jónamengun.
Greining: Buffer WB þvottasúlunni var sleppt eða aðeins þvegin einu sinni, sem leiddi til leifar af jónamengun.
Ráðlegging: Vertu viss um að þvo tvisvar með Buffer WB samkvæmt leiðbeiningunum til að fjarlægja leifar af jónum eins mikið og mögulegt er.
3. RNase mengun.
Greining: utanaðkomandi RNase er bætt við bufferinn;röng þvottaaðgerð í Buffer PW mun leiða til afgangs RNase og hafa áhrif á RNA tilraunaaðgerðir aftan við RNA, eins og in vitro umritun.
Tillaga: Kjarnsýruútdráttarsett úr Foregene röð geta fjarlægt RNA án viðbótar RNase og öll hvarfefni í Plant DNA einangrunarsettinu þurfa ekki RNase;vertu viss um að þvo hreinsunarsúluna með Buffer PW samkvæmt leiðbeiningunum og ekki er hægt að sleppa þessu skrefi.
4. Etanólleifar.
Greining: Eftir þvott á hreinsunarsúlunni með Buffer WB var engin skiljun í tómum túpum framkvæmd.
Tilmæli: Fylgdu leiðbeiningunum um rétta skilvindu í tómum túpum.
Leiðbeiningar bæklingur:
Notkunarhandbók fyrir DNA einangrunarsett fyrir plöntur