Koma á SOP fyrir PCR tilraun til að staðla hegðun tilraunastarfsmanna.
Tilraunamaður fer nákvæmlega eftir verklagsreglum og lágmarkar PCR mengun sem kann að stafa af mannlegum þáttum eða kemur í veg fyrir að mengun komi fram.Að auki ætti tilraunamaður að hafa tilheyrandi faglega þekkingu og færni, þar á meðal kunnáttu í að stjórna tengdum búnaði, skýra allt vinnuferlið, ná tökum á meðferðaraðferðum við mengun og gæðaeftirlitsaðferðum á rannsóknarstofu og vera fær um að túlka prófunarniðurstöðurnar rétt.
Stofna staðlaða PCR rannsóknarstofu.
PCR rannsóknarstofu er í meginatriðum skipt í fjögur svæði, þ.e. hvarfefna undirbúningssvæði, sýnisvinnslusvæði, mögnunarsvæði og mögnunarvörugreiningarsvæði.Fyrstu tvö svæðin eru formögnunarsvæði og tvö síðustu svæðin eru eftirmögnunarsvæði.Formögnunarsvæðið og eftirmögnunarsvæðið ætti að vera stranglega aðskilið.Tilraunaefni, hvarfefni, skráningarpappír, pennar, hreinsiefni o.s.frv., geta aðeins flætt frá formögnunarsvæðinu til eftirmögnunarsvæðisins, það er frá undirbúningssvæði fyrir hvarfefni → sýnisvinnslusvæði → mögnunarsvæði → greiningarsvæði mögnunarafurða, og má ekki flæða aftur á bak.Loftflæðið á rannsóknarstofunni ætti einnig að flæða frá formögnunarsvæðinu til eftirmögnunarsvæðisins og ekki flæða aftur á bak.Hin fullkomna PCR rannsóknarstofuhönnun er sýnd hér að neðan:
Mynd A: Tilvalin PCR rannsóknarstofuuppsetning með undirþrýstingi í biðminni
Mynd B: Tilvalin PCR rannsóknarstofuuppsetning með jákvæðum þrýstingi í biðminni
Uppsetningarskýringarmyndir fyrir PCR rannsóknarstofu sem gefnar eru upp á mynd A og mynd B ættu að vera ákjósanlegri uppsetningarhamur og rannsóknarstofan með skilyrði getur vísað til þessa háttar fyrir hönnun.Fyrir venjulegar rannsóknarstofur er mælt með því að hægt sé að aðskilja PCR mögnunarsvæðið og vörugreiningarsvæðið og minnka opið á hlífinni eins mikið og mögulegt er á sýnishorninu og PCR mögnunarsvæðinu.Mundu: Það er stranglega bannað að fara með vörur og tilraunabirgðir á afurðagreiningarsvæðinu á sýnaundirbúningssvæðið og PCR mögnunarsvæðið.
Ef rannsóknarstofan framkvæmir eingöngu PCR greiningu og auðkenningu er mælt með því að nota flúrljómandi magn PCR í stað hefðbundins PCR.
Hægt er að safna og greina niðurstöður úr megindlegum PCR greiningu með flúrljómun, þannig að það er engin þörf á að opna lokið fyrir rafskaut eftir efnahvarfið, sem kemur í veg fyrir mengun PCR vörunnar sem stafar af leka hvarfefna til að mynda úðabrúsa.Ef þú eykur fjölda lokopna meðan á hleðsluþrepinu hlaup rafskauts stendur, er líklegt að úðabrúsummengun eigi sér stað.Mælt er með því að efla notkun megindlegrar PCR og skipta smám saman út eigindlegri PCR.
UNG and-PCR vörumengunarkerfið er notað fyrir PCR viðbrögðin.
Kerfið notar dUTP í stað dTTP.Eftir PCR hvarfið eru allar PCR afurðir (DNA brot) felldar með dUTP;í næstu umferð PCR hvarfsins er UNG ensímið sem bætt er við kerfið ræktað við 37°C í 5 mínútur fyrir PCR, sem getur sérstaklega brotið niður öll DNA brot sem innihalda dUTP, og síðan framkvæmt PCR hvarf.Þetta getur alveg fjarlægt úðabrúsamengun sem stafar af PCR vörum.Áhrifin eru sýnd á myndinni hér að neðan:
Athugið: Fyrir beina PCR seríuna geturðu valið röð vörurnar frá Foregene gegn PCR vörumengunarkerfinuLeggðu til
Fyrir rannsóknarstofur sem framkvæma umfangsmiklar arfgerðarprófanir er eindregið mælt með því að nota UNG and-PCR vörumengunarkerfið til að prófa hvarfefni auk þess að byggja sanngjarnar rannsóknarstofur.
Áminning: Notkun þessa kerfis getur ekki fjarlægt PCR vörumengunina sem þegar hefur verið af völdum.Þess vegna ætti að nota UNG kerfið í upphafi viðkomandi prófunar og UNG kerfið ætti að nota til PCR mögnunar, til að koma í veg fyrir mengun PCR efna Falsjákvætt.
Mælt er með því að nota Direct PCR-UNG kerfið frá Foregene þegar farið er í umfangsmiklar prófanir, svo sem:
Plant Leaf Direct PCR Kit-UNG；
Plant Seed Direct PCR Kit-UNG；
Animal Tissue Direct PCR Kit-UNG；
Mouse Tail Direct PCR Kit-UNG；
Zebra Fish Direct PCR Kit-UNG.
Þessi röð af pökkum frá Foregenegetur ekki aðeins framkvæmt PCR uppgötvun fljótt og í stórum stíl, heldur einnig í raun komið í veg fyrir og stjórnað PCR vörumengun.
Pósttími: 19. mars 2021
