Fæðing PCR
PCR (pólýmerasa keðjuverkun)
Það eru meira en 30 ár síðan pólýmerasa keðjuverkun var fundin upp.Í meira en 30 ár, eftir að fjölmargir fræðimenn um allan heim halda áfram að bæta við og bæta, hefur PCR tækni orðið útbreiddasta og mest notaða og mikilvægasta grunnrannsóknaraðferðin á öllu lífvísindasviðinu.
TouchDown PCR, Real-Time PCR, Multi PCR, o.s.frv., þróað á grundvelli víðtækrar beitingar hefðbundinnar PCR tækni, sem og nýuppkominn Digital PCR (stafrænn PCR), hafa auðgað rannsóknaraðferðir meirihluta vísindamanna til muna og hraðað mjög þróunarferli nútíma lífvísinda, sérstaklega sameindalíffræði, hefur lagt mikið af mörkum til lífs og náttúru mannkynsins.
Gallar hefðbundinnar PCR tækni
Flókin kjarnsýruskilnaður ogútdráttur:
★ Hefðbundin PCR tækni: krafist
★ PCR afleidd tækni: krafist
★ DNA og RNA sýni: mikill munur, erfiðar rekstrarkröfur
★ Líkamshættur: eitruð hvarfefni skaða líkamann
Hefðbundin PCR tækni og afleidd tækni hafa forsendur-kjarnsýru aðskilnað og hreinsun
Sérhvert lífsýni þarf að fara í gegnum röð flókinna og leiðinlegra sýnavinnslu til að fá kjarnsýrusýni sem uppfylla kröfur PCR tækninnar.
Aðskilnaður og útdráttur DNA og RNA hefur alltaf verið grunnverkefni sem viðeigandi vísindamenn þurfa að endurtaka á hverjum degi.
Vegna mikils munar á sýna eru aðskilnaðar- og útdráttarferli DNA og RNA einnig mjög mismunandi.Þessi vinna krefst mikillar tæknikunnáttu rekstraraðila.Hefðbundnar aðskilnaðar- og útdráttaraðferðir krefjast langtímasnertingar við sum mjög eitruð efnafræðileg hvarfefni.Það mun valda óafturkræfum skemmdum á líkama rekstraraðilans og jafnvel valda beinum skaða meðan á tilrauninni stendur.
Á sama tíma er aðskilnaður og útdráttur kjarnsýra vinnufrekt verkefni fyrir þá sem hafa mikinn fjölda sýna til að rannsaka.
Kjarnsýrueinangrunar- og útdráttarsett á markaðnum eru nú fullþroskuð og það eru mörg vörumerki, en þau eru nokkurn veginn þau sömu.Hvort sem það er miðflóttasett með kísilgelhimnusúlu eða segulmagnaðir perluaðferðarsett, tekur það mikinn tíma og er kostnaðarsamt.Auk kostnaðar við settið eru einnig sérstakar kröfur um rannsóknarstofubúnað.Sjálfvirka vinnustöðin sem notuð er í segulmagnaðir perluaðferðinni er mjög dæmigerður stórtækur hágæða búnaður, sem er gríðarlegur kostnaður fyrir rannsóknarstofuna.
Í stuttu máli
Áður en PCR tilraunir eru framkvæmdar er formeðferð sýna óumflýjanleg og alltaf höfuðverkur fyrir vísindamenn.Hvernig eigi að leysa þetta vandamál og hvort hægt sé að framkvæma PCR tilraunir án aðskilnaðar og útdráttar kjarnsýra hefur alltaf verið hugsun meirihluta vísindamanna og starfsfólks á klínískum rannsóknarstofum.
Foregenes lausn
Eftir margra ára erfiðar rannsóknir á Direct PCR tækni og tengdum pökkum, braut Forgene með góðum árangri í gegnum marga flöskuhálsa og náði beinni PCR fyrir margar tegundir mismunandi sýna með sterka mótstöðu og aðlögunarhæfni, sem gerir vísindamönnum kleift að losna við fyrirferðarmikinn og hættulegan aðskilnað og útdrátt kjarnsýra.Þetta mun draga mjög úr vinnuafli allra, flýta fyrir tilraunaferlinu og spara vísindarannsóknir og prófunarkostnað.
Skilningur og þekkingu Forgene á DirectPCR
Í fyrsta lagi er DirectPCR tækni bein PCR tækni fyrir ýmsa lífsýnisvef.Undir þessu tæknilegu ástandi er engin þörf á að aðskilja og draga út kjarnsýrur og vefjasýnin er beint notað sem hlutur og markgena frumurunum er bætt við fyrir PCR viðbrögð.
Í öðru lagi er DirectPCR tæknin ekki aðeins hefðbundin DNA sniðmát mögnunartækni, heldur felur hún einnig í sér RNA sniðmát öfug umritun PCR.
Í þriðja lagi framkvæmir DirectPCR tæknin ekki aðeins beinlínis venjubundin eigindleg PCR viðbrögð á vefjasýnum, heldur felur hún einnig í sér rauntíma qPCR viðbrögð, sem krefst þess að hvarfkerfið hafi sterka getu til að standast bakgrunnsflúrljómunartruflun og að andstæðingur innrænna flúrljómunardeyfingar.
Í fjórða lagi krefjast vefjasýnanna sem DirectPCR tæknin miðar að aðeins losun kjarnsýrusniðmáta og fjarlægja ekki prótein, fjölsykrur, saltjónir osfrv. sem trufla PCR viðbrögðin.Þetta krefst þess að kjarnsýrupólýmerasa og PCR Mix í hvarfkerfinu hafi framúrskarandi and-afturkræfni og aðlögunarhæfni og getur tryggt ensímvirkni og afritunarnákvæmni við flóknar aðstæður.
Í fimmta lagi hafa vefjasýnin, sem DirectPCR tæknin miðar að, ekki farið í neina kjarnsýruauðgunarmeðferð og sniðmátsmagnið er mjög lítið, sem krefst mjög mikillar næmni og mögnunarvirkni hvarfkerfisins.
Niðurstaða
DirectPCR tæknin er ein mikilvægasta tækniþróun og nýjung undanfarin 30 ár frá fæðingu PCR tækninnar.Forgene hefur og mun halda áfram að vera brautryðjandi og frumkvöðull þessarar tækni.
Notkunarhorfur DirectPCR tækni eru mjög víðtækar.Stöðugar umbætur og kynningu á þessari tækni mun örugglega leiða til niðurrifsbreytinga á vísindarannsóknum og skoðunarstarfi.Þetta er PCR tæknibylting.
Birtingartími: 21-2-2017
